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摘要：目的 探究黄芩汤介导miR-143调控溃疡性结肠炎小鼠铁死亡的分子机制研究。方法 采用葡聚糖硫酸钠进行造模，实验分为正常组、模型组、黄芩汤组、miR-143 antagomiR组、黄芩汤＋miR-143 antagomiR组。HE染色观察病理学改变，试剂盒检测小鼠血清中LDH、MDA、GSH的含量，qPCR检测小鼠结肠组织中miR-143、GPX4、ASCL4、FTH1 mRNA的含量，Western blot检测小鼠结肠组织中GPX4、ASCL4、FTH1蛋白含量。结果 与正常组相比，模型组与miR-143 antagomiR组结肠组织病理有损伤，小鼠血清中LDH、MDA明显升高，GSH明显降低，结肠组织中miR-143、GPX4、FTH1 mRNA明显降低，ASCL4 mRNA明显升高，GPX4、FTH1蛋白表达量明显降低，ASCL4蛋白表达量明显升高；与模型组相比，黄芩汤组结肠病理组织损伤有改善，小鼠血清中LDH、MDA明显降低，GSH明显升高，结肠组织中miR-143、GPX4、FTH1 mRNA明显升高，ASCL4 mRNA明显降低，GPX4、FTH1蛋白表达量明显升高，ASCL4蛋白表达量明显降低；与黄芩汤组相比，黄芩汤＋miR-143 antagomiR组结肠组织病理损伤加重，小鼠血清中LDH、MDA明显升高，GSH明显降低，结肠组织中miR-143、GPX4、FTH1 mRNA明显降低，ASCL4 mRNA明显升高，GPX4、FTH1蛋白表达量明显降低，ASCL4蛋白表达量明显升高；与miR-143 antagomiR组相比，黄芩汤＋miR-143 antagomiR组结肠组织病理损伤有改善，小鼠血清中LDH、MDA明显降低，GSH明显升高，结肠组织中miR-143、GPX4、FTH1 mRNA明显升高，ASCL4 mRNA明显降低，GPX4蛋白表达量明显升高，ASCL4蛋白表达量明显降低。结论 降低小鼠结肠组织miR-143表达会促进铁死亡的发生，黄芩汤可通过介导miR-143调控铁死亡改善UC小鼠。
文章目录
1 材料
1.1 动物
1.2 药物与试剂
1.3 仪器
2方法
2.1 黄芩汤溶液的制备
2.2 动物分组
2.3 动物造模及给药
2.4 样本收集
2.5 苏木素-伊红（hematoxylin-eosin，HE）染色观察结肠组织病理形态
2.6 检测小鼠血清中LDH、MDA、GSH水平
2.7 实时荧光定量PCR (Quantitative Real-time PCR， qPCR)检测结肠组织中miR-143、GPX4、ASCL4、FTH1
2.8 蛋白免疫印迹(Western blot)法检测结肠组织中GPX4、ASCL4、FTH1
2.9 统计学方法
3 结果
3.1 小鼠结肠长度
3.2 病理结果
3.3 小鼠血清中LDH、MDA、GSH含量
3.4 q-PCR法检测结肠组织miR-143、GPX4、ASCL4、FTH1
3.5 Western blot法检测各组GPX4、ASCL4、FTH1
4 讨论
