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摘要:基于网络药理学和动物实验,研究大黄-芒硝(Rhei Radix et Rhizoma-Natrii Sulfas,RRR-NS)药对治疗急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)的作用机制。通过TCMSP平台检索药物活性成分与潜在作用靶标,利用Cytoscape 3.7.2构建“药物-化学成分-潜在靶点”网络图,STRING数据库构建蛋白相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络,DAVID数据库和R软件进行GO和KEGG富集分析,使用AutoDock分子对接软件验证有效成分与靶点的结合能力。然后,采用50 g/L牛黄胆酸钠诱导AP小鼠模型进行验证。网络药理学结果表明从RRR-NS中筛选出11种有效成分及58个潜在作用靶点,其中51个与AP相关。KEGG分析结果表明,这些靶点主要涉及乙型肝炎、肿瘤蛋白p53(tumor protein p53,TP53)、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)等信号通路。PPI结果表明,肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,??TNF)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、TP53等7个蛋白为RRR-NS治疗AP的核心靶点。动物实验结果显示,RRR-NS显著改善了AP大鼠的胰腺和肝组织病理损伤,降低了血清中α-淀粉酶、脂肪酶、IL-1β、TNF-α的水平,并减少了胰腺组织中半胱天冬蛋白酶3(cysteine aspartate protease-3,Caspase-3)、TP53、Jun原癌基因(jun proto-oncogene,JUN)蛋白的表达。综上所述,RRR-NS可能通过降低Caspase-3、TP53、JUN表达,抑制炎症反应,从而改善AP。
文章目录
1 材料与方法
1.1 动物
1.2 药物及试剂
1.3 仪器
1.4 网络药理学分析
1.4.1 RRR-NS的靶点预测
1.4.2 AP的靶点筛选
1.4.3 RRR-NS-AP交集靶点基因获取
1.4.4蛋白相互作用网络构建
1.4.5 GO和KEGG富集分析
1.5 分子对接技术
1.6 动物实验
1.6.1动物造模及干预分组
1.6.2 HE染色
1.6.3 血清α-淀粉酶、脂肪酶、IL-1β和TNF-α的检测
1.6.4 Western blot检测
1.7 统计学方法
2 结果与分析
2.1 RRR-NS活性成分
2.2 RRR-NS治疗AP的潜在靶点
2.3 RRR-NS与AP交集靶点基因功能分析
2.4 RRR-NS治疗