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摘要：目的：本研究探讨针刺内关穴对磷酸酶和张力蛋白同源（PTEN）基因下调的孤独症（ASD）幼鼠模型髓鞘重塑及磷脂酰肌醇3激酶/ 蛋白激酶B/糖原合成酶激酶3β（PI3K/AKT/GSK3β）通路的影响。方法：通过丙戊酸钠（VPA）腹腔注射联合shRNA-PTEN腺病毒构建ASD模型，幼鼠分为正常组、模型组、针刺组及假针刺组。针刺组于出生后7-21天行双侧内关穴干预，通过行为学（旷场、自我捋毛、三箱社交、水迷宫）、形态学（HE染色、电镜）及分子检测（免疫组化、WB、q-PCR）评估效果。结果：模型组体重、尾长及趋地性异常（均P<0.05），且社交能力下降、刻板行为增多、学习记忆受损；针刺组显著改善上述指标（P<0.05），并减少髓鞘增厚及分层。分子机制显示，针刺上调PTEN蛋白/mRNA表达，抑制AKT磷酸化及MBP，增强GSK3β活性（均P<0.05），PI3K无显著变化。结论：针刺内关穴通过激活PTEN抑制PI3K/AKT/GSK3β通路，减少少突胶质细胞异常增殖，促进髓鞘重塑，改善ASD行为，为针刺治疗提供实验依据。
文章目录
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1动物
1.1.2主要试剂与仪器
1.2 方法
1.2.1 分组与模型制备
1.2.1.1幼鼠PTEN-ASD动物模型的制备
1.2.1.2大鼠PTEN基因沉默腺病毒制备
1.2.2 干预方法
1.3观察指标及检测方法
1.3.1常规观察：
1.3.2神经行为学检测：
1.3.2.1趋地性测试
1.3.2.2 三箱社交实验
1.3.2.3 旷场实验
1.3.2.4 自我捋毛实验
1.3.2.5 水迷宫实验
1.3.3 幼鼠脑组织切片镜下观察
1.3.4 免疫组化法
1.3.5 蛋白免疫印迹（Western Blotting，WB）检测
1.3.6 qPCR检测
1.4 统计学方法
